樹木褐根病檢測試劑商品化技術建立發佈日期：2012/12/10
實施期間起迄
101年12月10日執行單位
吳孟玲組長 \ 行政院農業委員會林業試驗所執行成果
褐根病（brown root rot disease）是國內林木目前最嚴重的病害，本病害是由病原真菌Phellinus noxius所引起。由於樹木罹病初期不易以外部病徵來診斷，為掌握防治先機，本計晝研究團隊已針對病原菌發展聚合酶鏈鎖反應（PCR）技術進行分子檢測，研究成果有助於提高病害診斷效率。本年度研究主要持續改進已建立之PCR診斷技術，並開發新的LAMP分子檢測技術，(LAMP, Loop-mediated isothermal Amplification) 恆溫環狀擴增法，近年逐漸被應用在疫病蟲害的檢測上，LAMP技術與PCR技術主要不同之處在於前者可以在恆溫下反應，所以只需要溫度能達到60-70℃的簡單恆溫儀器，如水浴槽(water bath)或加熱板(heat block)。LAMP技術的特點有：(1)不需要昂貴的PCR儀器，只需要水浴槽或加熱器等恆溫器即可。對於某些田間檢測、偏遠地區實驗室來說，相當簡單實用。(2)專一性相對高，(3) 反應時間短(40~60分鐘)，(4)靈敏度高，(5)檢測反應所產生的白色沉澱用肉眼或濁度計即可觀察，相當簡便。若再加入核酸染劑則靈敏度則更佳。實際應用於田間實際篩檢試驗，我們檢測植物園17株疑似感染褐根病之樹木進行採樣檢測，結果其中有五株現地病徵明顯且LAMP檢測呈陽性反應，有七株現地病徵明顯但LAMP檢測呈陰性反應，有五株現地無明顯病徵且LAMP檢測呈陰性反應，我們進一步以六株感染樹木為中心對周邊十株樹木進行採樣檢測，結果發現六組樣區中，感染率分別為40% (4/10)、10% (1/10)、10% (1/10)、30% (3/10)、70% (7/10) 及20% (2/10)，根據現地觀察病徵以及培養基上之菌絲型態的結果可以發現，許多無法以肉眼觀察到之病原菌可以經由高靈敏度之LAMP分子檢測技術偵測出，因此LAMP分子檢測技術是日後進行褐根病感染初期篩檢時之一項有利工具。
