應用RNAi技術調控大豆BBI含量對提升國產大豆利用價值之研究發佈日期:2009/12/30
實施期間起迄
98年12月30日執行單位
程台生、吳昭慧、陳麗珠執行成果
大豆種子含有蛋白質水解酵素抑制素(protease inhibitor),使其用於動物飼料時,因為阻礙牲畜腸胃消化酵素活性,所以必需經由加熱去除後,才可供動物食用。相對而言,不但成本增加也因而破壞其他營養物質,而降低大豆的價值。本研究藉由干擾性核醣核酸(RNA Interference; RNAi)之技術,來降低大豆種子中的主要蛋白質水解酵素抑制素BBI (Bowman-Brik protease inhibitors)含量,減少加工成本,使得動物在食用大豆飼料的情況下,也可以正常消化與吸收。目前使用已構築BBI之反義股載體,以國內外六個大豆品系,進行大豆下胚軸不定芽基因轉殖,之後再藉由分子生物以及蛋白質體分析方法,測定轉殖大豆種子在形成過程前後,其BBI基因與蛋白質表現之情況。此外,本研究也嘗試使用miRNA方法,來達成相同之目的。通常miRNA可以達到更好的基因靜默的抑制效果,能更有效的降低大豆種子中BBI含量。目前使用gma-MIR319c為骨架,以GUS專一序列取代原目標序列,利用有GUS表現之基因轉殖菸草,測試本系統是否有抑制基因表現之功能,之後才將其利用於抑制大豆BBI基因之表現。最後,當大豆不定芽基因轉殖系統,以及大豆RNAi技術皆完整建立後,未來在其它基因研究或是調控上,也相對更加方便也更加有效。