影響核移置重組豬卵 (複製動物) 激活與胚發育因子之探討發佈日期：2010/01/01
實施期間起迄
99年01月01日執行單位
林育安執行成果
本計畫為二年之研究計畫，第一年已先初步建立體細胞之繼代培養、冷凍與解凍技術，並完成三個小試驗。第二年已完成四個小試驗，試驗一：探討供核體細胞注入卵母細胞之位置對體外成熟豬卵母細胞之核移置重組卵激活暨隨後胚發育之影響。試驗結果顯示，將卵丘細胞注入於卵母細胞卵質內邊緣其激活率、原核形成率與胚發育率高於注入卵黃囊間隙與卵質內者，顯示卵質內邊緣可能為理想之注入位置，有利於核移置重組豬卵之發育。試驗二：探討成熟培養時間對豬卵母細胞體外成熟、核移置重組卵之激活暨隨後胚發育之影響。試驗結果顯示，豬卵母細胞於體外成熟時間顯著影響到核移置重組卵之激活與胚發育，成熟培養 48 小時為最適當之培養時間。試驗三：探討供核體細胞對體外成熟豬卵母細胞之核移置重組卵激活暨隨後胚發育之影響。以繼養 4 代 (F4) 之卵丘細胞與繼養 10 代 (F10) 之豬耳朵細胞為供核細胞進行核移置試驗，結果顯示供核細胞種類不會顯著影響核移置重組卵之激活率、原核形成率與胚發育率。然而，耳朵細胞組發育到桑椹胚之比率顯著高於卵丘細胞組，顯示耳朵細胞組較有利於胚之發育。試驗四：探討激活方式對體外成熟豬卵母細胞核移置重組卵之激活暨隨後胚發育之影響。試驗結果顯示，激活方法顯著影響核移置重組豬卵之激活率、原核形成率與胚發育率，發現於四種激活方法中，以核移置卵母細胞經電融合後，置於胚培養液中培養 4 小時，再以電流強度 1.2 kV/cm 進行 1 次電激活之方法最佳。
