應用RNAi技術調控大豆BBI含量對提升國產大豆利用價值之研究發佈日期：2010/01/01
實施期間起迄
99年01月01日執行單位
程台生、吳昭慧、陳麗珠、葉淳方、邱名禪執行成果
利用RNA interference (RNAi)機制把我們有興趣的基因，先使之靜默(silencing)後，再經由生物的表現型、基因型、蛋白質體分析，亦或是從整體代謝機制中，找出特定基因功能的相關研究與技術發展，越來越進步。在靜默大豆BBI基因的研究中，我們接續先前設計並構築具有特別用途之載體。這個載體帶有35S rRNA promoter，搭配這個promoter後面加有poly(A)之序列為CaMV 35S rRNA promoter之terminator，兩者中間為Marker gene。而在3’-UTR的序列中，放置一段stuffer，以後再用我們要靜默的BBI基因標定序列來取代這個stuffer。在測定靜默效果的實驗中，RNAi機制如果造成Marker gene的靜默，即可十分方便研究者評估實際RNAi的功效。目前是已完成的測試基因靜默的結果，圖一為黄豆胚軸基因轉殖操作流程，圖二表示菸草經過連續兩次基因轉殖後，GUS基因在轉殖植物被靜默的效果。使用螢光反應偵測GUS基因，在轉殖株的表現(圖三) 。因此，amiRNA靜默技術所須的載體設計與效果經測試後為可行。反義BBI轉殖黄豆的研究，目前進展到T1植株(圖四)已結豆莢，預定春天完成分子生物分析與生化測定。
