表現異黃酮素配醣體代謝酵素乳酸菌之選殖發佈日期：2008/12/30
實施期間起迄
97年12月30日執行單位
汪嵩遠執行成果
近年來大豆所含的異黃酮素被廣泛的研究，雖然血清異黃酮素濃度變化與療程呈正相關，但於試驗結案時，約有30%受試者血清異黃酮素濃度變化於統計上無顯著差異，其中更約15%受試者血清異黃酮素濃度幾乎無變化甚至減少。故推論與腸道微生物缺乏異黃酮素配醣體代謝酵素之細菌組成有關。本計畫之目標在於選殖對異黃酮配醣體代謝活性較高之菌株，特別是對人體之益生菌。實施方法如下：1.以無菌PBS將泡菜發酵液、豆腐乳稀釋並分裝試管中於37℃培養
2.選出分層明顯之試管(如圖) 取1cc培養於MRS broth試管中37℃培養
3.選出最佳分層明顯之試管以MRS broth進行10次10:1稀釋於30℃培養
4.選出分層明顯且生長速度適宜之濃度試管取1cc接種於MRS agar plate觀察菌落數目
5.選出菌落數約200-300株的濃度試管接種於8-10個MRS agar plate
6.擇一plate對其200-300株菌落培養於不含異黃酮素MRS broth測OD值
7.根據每管OD值取不同量菌液培養於含異黃酮素MRS broth培養並進行HPLC測定，篩選代謝異黃酮素Genistein、Daidzein能力佳者菌
8.將所得菌株進行乳酸菌試驗colony分離及鑑定